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    UNITA’ DI PRODUZIONE DI PROTEINE E ANTICORPI

    UNITA’ DI PRODUZIONE DI PROTEINE E ANTICORPI

    Group Leader: Alessandra Fucci (PhD)

    Senior advisor: Maria Luisa Nolli (PhD)

    Staff: Assunta Riccio (PhD)

             Egildo Luca D’Andrea (PhD)

             Simona Giacobbe (PhD)

             Ylenia Abruzzese (BSc)

     
     
    Principali aree di attività 
    I ricercatori dell’Unità hanno una consolidata esperienza nello sviluppo, nella produzione, nella purificazione e nella caratterizzazione di proteine ricombinanti, di anticorpi e di derivati anticorpali, nonché nella generazione di anticorpi monoclonali innovativi, mediante la tecnologia dell’ibridoma. 

    Le attività includono anche: messa a punto e validazione di test immunoenzimatici; analisi dell’affinità e di cinetica di legame mediante SPR; sviluppo di protocolli per l’industrializzazione dei processi di produzione di biosimilari; produzione di enzimi ricombinanti.

     
    Tecnologie principali

    L’Unità dispone di molteplici ceppi e linee cellulari ed ha una vasta libreria di vettori di espressione, da impiegare nei processi produttivi di proteine e anticorpi.

    L’utilizzo di strumenti e di tecnologie all’avanguardia e l’impiego di strategie su misura, disegnate ad hoc per ciascun progetto, consentono di operare ad alta efficienza e con un elevato grado di successo. Infine, l’accesso a metodi analitici avanzati, che includono SPR, HPLC e LC-MS/MS, consente di effettuare una caratterizzazione completa delle biomolecole prodotte.

     

    Principali servizi offerti

    Produzione e caratterizzazione di proteine ed anticorpi ricombinanti
    • Sintesi genica, ottimizzazione dei codoni e generazione di vettori di espressione
    • Test di espressione in E. coli, P. pastoris o Mammalian cells
    • Ottimizzazione dell’espressione e messa a punto dei protocolli di purificazione
    • Scale-up della produzione
    • Analisi di quantità, purezza ed integrità (UV-Vis, SDS-PAGE, HPLC e Western Blot)
    • Caratterizzazione biochimica (HPLC, LC-MS/MS) e studi di affinità (SPR)
    • Dosaggio e rimozione dell’endotossina
    • Marcatura/coniugazione

    Schermata 2023 09 22 alle 15.21.13 

     

    Sviluppo di anticorpi monoclonali e policlonali

    • Definizione delle strategie di immunizzazione
    • Design e produzione dell’antigene (opzionale)
    • Immunizzazione (topi, ratti o conigli) ed esecuzione dei test di titolazione
    • Generazione e screening di ibridomi (solo per la produzione di mAb)
    • Stabilizzazione e banking degli ibridomi
    • Purificazione degli anticorpi (0.1-100 mg)
    • Caratterizzazione degli anticorpi (isotipizzazione, SDS-PAGE, ELISA, HPLC, SPR)

    Schermata 2023 09 22 alle 15.21.13

     

    Sviluppo di saggi immunoenzimatici

    • Selezione e pairing degli anticorpi
    • Generazione della calibration curve per applicazioni quantitative
    • Ottimizzazione, qualifica e validazione del saggio in diverse matrici
    • Produzione e fornitura di kit custom
    • Adeguamento di metodi ELISA già esistenti per l’uso in nuove applicazioni.

    Schermata 2023 09 22 alle 15.21.13

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